【摘 要】
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对CTAB-mini法进行改良,得到一种效率较高的柑橘DNA提取方法。试验结果表明,得到的高质量DNA适合柑橘ISSR分析。同时,采用正交设计对影响柑橘ISSR-PCR因子进行优化。试验结果
【机 构】
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福建农林大学园艺学院,福建农林大学园艺产品贮藏保鲜研究所,
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对CTAB-mini法进行改良,得到一种效率较高的柑橘DNA提取方法。试验结果表明,得到的高质量DNA适合柑橘ISSR分析。同时,采用正交设计对影响柑橘ISSR-PCR因子进行优化。试验结果表明:20μl反应体系中采用5ng模板DNA、0.35mmol/LdNTPs、0.15μmol/LPrimer、1UTaq酶和3μl10×Buffer(含Mg2+)为柑橘ISSR-PCR最优反应体系。
The CTAB-mini method was improved to obtain a more efficient citrus DNA extraction method. The experimental results show that the high quality DNA obtained is suitable for citrus ISSR analysis. At the same time, orthogonal design was used to optimize the ISSR-PCR factors affecting citrus. The results showed that 5ng template DNA, 0.35mmol / LdNTPs, 0.15μmol / LPrimer, 1UTaq enzyme and 3μl 10 × Buffer (containing Mg2 +) were the optimal citrus ISSR-PCR reaction system in 20μl reaction system.
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