用双拷贝逆转录病毒载体转导人G-CSF cDNA的实验研究

来源 :第二军医大学学报 | 被引量 : 0次 | 上传用户:xiahou001
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为克服逆转录病毒中内部启动子对插入外源基因表达的干扰,将人G-CSF(粒细胞集落刺激因子)cDNA插入双拷贝载体N2A的3'LTRU3区上的多克隆立点,酶切鉴定后将重组质粒用电击转导法转入Psi-2嗜单性包装细胞系,经G-418选择压力,两周后挑出阳性克隆,测定感染滴度后转染NIH3T3细胞,选择挑出抗性克隆,测定G-CSF表达量,最高达53.3U/10^6细胞。Southern印迹和Northe
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