家蚕miR-14的上调表达与靶基因的预测分析

来源 :中国农业科学 | 被引量 : 0次 | 上传用户：yangleiyang

【摘要】

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【目的】了解家蚕细胞中上调miRNA的方法及靶基因预测,为家蚕miRNA的功能研究提供方法参考。【方法】构建家蚕miR-14的真核表达载体pSK-hr3-ie1-EGFP-pri-mir-14并在家蚕BmN

【作者】

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刘悦羊兰翠聂作明陆旋吕正兵陈健于威吴祥甫张耀

【机构】

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浙江经贸职业技术学院应用工程系,浙江理工大学生命科学学院生物化学研究所

【出处】

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中国农业科学

【发表日期】

：

2013年6期

【关键词】

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家蚕 bmo-miR-14 表达上调靶基因预测 Bombyx mori bmo-miR-14 upregulation targeted genes

【基金项目】

：

浙江省自然科学基金项目（LY12C06003,Y3090304）, 国家高技术研究发展计划“863”项目（2011AA100603）

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【目的】了解家蚕细胞中上调miRNA的方法及靶基因预测,为家蚕miRNA的功能研究提供方法参考。【方法】构建家蚕miR-14的真核表达载体pSK-hr3-ie1-EGFP-pri-mir-14并在家蚕BmN细胞中表达,同时通过转染化学合成的miRNA mimics上调BmN细胞中miR-14的水平。首先通过PCR扩增miR-14的前体及其侧翼序列（pri-mir-14）并克隆至真核表达载体pSK-hr3-ie1-EGFP的EGFP基因下游。分别将重组质粒pSK-hr3-ie1-EGFP-pri-mir-1

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