【摘 要】
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构建含适当限制酶切位点的adr亚型乙肝病毒(HBV)中蛋白基因克隆,比较分析序列变化,用作HBV疫苗表达及诊断试剂的研究.患者血清经蛋白酶K消化,再以酚-氯仿抽提,对提取物进行PC
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构建含适当限制酶切位点的adr亚型乙肝病毒(HBV)中蛋白基因克隆,比较分析序列变化,用作HBV疫苗表达及诊断试剂的研究.患者血清经蛋白酶K消化,再以酚-氯仿抽提,对提取物进行PCR扩增.回收PCR阳性产物,经琼脂糖酶消化后直接克隆至T载体.转化后提取质粒经PCR及酶切鉴定,再行序列分析.结果:10份血清提取物的PCR有3份获阳性产物,分别经T载体克隆后转化DH10b菌,3株阳性克隆经酶切及序列分析显示同属于adr亚型,与国内已发表序列的同源性大于99.6%.提示该克隆是用作HBsAg蛋白表达或探针标记研究的理想克隆.
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