大肠杆菌“菌影”的制备

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通过PCR扩增噬茵体PhiX174的裂解基因E,将该基因连接到含有PR/cI启动阻遇系统的pBV220载体中,从而使裂解基因E和启动阻遏系统入PL/PR-c1857串联成为温度敏感的裂解盒,构建溶茵质粒pBV-E.采用CaCl2法将其转入大肠杆茵BL21(DE3),含有裂解质粒的大肠杆菌在28℃务件下生长到对数生长期,然后升温到42℃诱导其溶解,制成了大肠杆菌茵影.电镜观察发现茵影形态完整,内容物全部被释放到胞外.
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