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目的
观察大鼠肺泡巨噬细胞对内毒素(LPS)重复刺激的耐受性与其Toll样受体4(TLR4)表达的变化,研究两者之间的联系.
方法将30只Wistar雄性大鼠分离所得肺泡巨噬细胞,用随机数字表法分为正常对照组(A组),LPS单次刺激组(B组)和LPS 2次重复刺激组(C组).用酶联免疫吸附测定(ELISA)法和逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)法分别检测各组大鼠肺泡巨噬细胞分泌肿瘤坏死因子α(TNF-α)及TLR4、白细胞介素10(IL-10)、IL-18 mRNA表达的变化,Western Blot检测TLR4蛋白表达的变化.
结果大鼠肺泡巨噬细胞TNF-α分泌和TLR4、IL-10、IL-18 mRNA表达及TLR4的蛋白表达水平,A组分别为(0.450±0.010)μg/L、1.16±0.04、0.97±0.03、1.320±0.020、58.1±0.4;B组分别为(0.760±0.030)μg/L、2.18±0.09、1.83±0.07、2.060±0.060、148.3±1.4;B组与A组比较差异有显著性(P＜0.01);C组分别为(0.490±0.050) μg/L、1.23±0.03、1.15±0.05、1.170±0.040、96.5±0.7;C组与B组比较差异也有显著性(P＜0.05或＜0.01)
结论LPS重复刺激可使大鼠肺泡巨噬细胞对LPS产生耐受性;LPS耐受性的产生与TLR4表达下降相关,TLR4表达量与功能下调是LPS耐受性产生的重要原因之一.