【摘 要】
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为进一步研究家蚕胰凝乳蛋白酶抑制剂基因SCI-SB的功能和作用机理,利用RT-PCR技术,从家蚕总RNA中扩增到家蚕SCI-SB基因片段,构建了含有GST标签的融合表达质粒pGEX4T-1-SCI-SB
【机 构】
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浙江大学生物化学研究所,浙江理工大学生物化学研究所
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为进一步研究家蚕胰凝乳蛋白酶抑制剂基因SCI-SB的功能和作用机理,利用RT-PCR技术,从家蚕总RNA中扩增到家蚕SCI-SB基因片段,构建了含有GST标签的融合表达质粒pGEX4T-1-SCI-SB.采用pGEX融合蛋白表达系统,在大肠杆菌BL21中得到以包涵体形式存在的重组GST融合蛋白质,表达量可占菌体蛋白的 15%.将包涵体变性、复性处理以后,进一步利用GSTTrapFF 亲合层析一步获得了重组蛋白.将该重组蛋白免疫新西兰纯种大白兔,获得效价高的多克隆抗体.胰凝乳蛋白酶活性抑制实验结果表明该重组
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