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褐藻多糖硫酸酯(fucoidan,FPS)是临床上治疗慢性肾衰竭中成药海昆肾喜胶囊的有效成分,具有潜在的抗衰老作rn用.然而,FPS是否能改善肾脏衰老,尤其是对于其抗衰老的分子机制,目前仍不清楚.将体外培养的人近端肾小管上皮细胞(HK-2)分为正常组(normal group,N)、模型组(D-gal model group,D)、低剂量 FPS 组(low dose of FPS,L-FPS)、高剂量 FPS 组(high dose of FPS,H-FPS)以及维生素E组(vitamin E,VE),分别进行不同的干预.N组加入1％胎牛血清(fetal bovine serum,FBS)1 mL;D 组加入75 mmol·L-1 D-gal;L-FPS 组加入75 mmol.L-1 D-gal+25 μg·mL-1 FPS;H-FPS 组加入75 mmol·L-1 D-gal+50 μg.mL-1 FPS;VE 组加入75 mmol·L-1 D-gal+50 μg·mL-1 VE.在干预后24 h,首先,观察 D-gal 对 HK-2细胞β-半乳糖苷酶(senescence-associated β-galactosidase,SA-β-gaI)染色特征以及 klotho,P53,P21 蛋白表达水平和腺苷酸活化蛋白激酶(adenosine monophosphate activated protein kinase,AMPK)-不协调的51 类激酶 1(uncoordinated 51-like kinase 1,ULK1)信号通路活性的影响;其次,观察FPS和VE对D-gal诱导的HK-2细胞SA-β-gal染色特征以及klotho,P53,P21蛋白表达水平的影响;最后,观察FPS 和VE 对D-gal 诱导的HK-2 细胞哺乳动物同族物微管相关蛋白1 轻链3(microtubule-associated protein 1 light chain 3,LC3)蛋白表达水平以及AMPK-ULK1信号通路活性的影响.结果表明,对于HK-2细胞,75 mmol-L-1的 D-gal能安全而有效地诱导细胞SA-β-gal染色特征和klotho,P53,P21蛋白表达水平的变化,也就是引发细胞衰老;而FPS和VE都能改善D-gal诱导的细胞SA-β-gal染色特征以及klotho,P21,P53蛋白表达水平的变化,也就是拮抗细胞衰老,这里,两者的作用是类似的;D-gal不仅能诱导细胞衰老,还能促进LC3 II,磷酸化AMPK(phosphorylated-AMPK,p-AMPK)以及磷酸化ULK1(phosphorylated-ULK1,p-ULK1)蛋白高表达,激活自噬相关AMPK-ULK1信号通路;而FPS和VE都能改善D-gal诱导的细胞LC3 II,p-AMPK以及p-ULK1 蛋白表达水平的变化,也就是抑制自噬相关AMPK-ULK1 信号通路活性.总之,对于D-gal 诱导的人近端肾小管上皮细胞衰老模型,FPS 与VE 相似,能改善肾脏细胞衰老,其分子机制可能与抑制自噬相关AMPK-ULK1 信号通路活性有关.这一发现为FPS 抗肾脏衰老提供了初步的药理学证据.