观察氢醌对人骨髓单个核细胞组蛋白去乙酰化酶(HDAC)活力、HDAC1和HDAC2 mRNA表达水平影响,以及加入HDAC抑制剂曲古抑菌素(TSA)作用10 h,HDAC活力、HDAC1和HDAC2 mRNA表达水平变化。
方法采集正常人骨髓制备单个核细胞悬液,分0 h对照组、氢醌3 h组、氢醌6 h组、氢醌12 h组、氢醌24 h组、氢醌+曲古抑菌素10 h组、氢醌10 h组,收集各组骨髓单个核细胞,提取细胞核蛋白和RNA,应用去HDAC试剂盒检测酶活力变化,实时荧光定量PCR检测HDAC1和HDAC2 mRNA表达水平。
结果氢醌3、6、12 h组HDAC酶活力分别为0 h对照组的1.31、1.53、1.148倍,差异有统计学意义(P<0.05)。RT-PCR结果显示,除了氢醌24 h组,氢醌3、6、12 h组HDAC1 mRNA表达量分别为0 h对照组的1.173、1.901、2.348倍,差异有统计学意义(P<0.05)。与对照组比较,氢醌3 h组和氢醌24 h组HDAC2 mRNA表达量的差异无统计学意义(P>0.05),氢醌6 h组和氢醌12 h组的HDAC2mRNA表达量分别为0 h对照组的1.426、1.766倍,差异有统计学意义(P<0.05)。HQ与TSA作用骨髓单个核细胞10 h结果显示,与氢醌10 h组比较,氢醌+曲古抑菌素10 h组的HDAC活力降低25.6%,差异有统计学意义(P<0.05);与对照组比较,氢醌+曲古抑菌素10 h组的HDAC活力升高13.0%,差异有统计学意义(P<0.05)。RT-PCR结果显示,HQ与TSA作用骨髓单个核细胞10 h,氢醌+曲古抑菌素10 h组比氢醌10 h组的HDAC1mRNA表达水平下降26.9%,HDAC2 mRNA表达水平下降19.3%,与对照组的差异均有统计学意义(P<0.05)。氢醌10 h组及氢醌+曲古抑菌素10 h组的HDAC2 mRNA和HDAC1 mRNA表达水平均明显高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。
结论在一定时间范围内,氢醌作用骨髓单个核细胞,HDAC活力,HDAC1和HDAC2 mRNA表达水平增加;HDAC抑制剂TSA可以降低氢醌引起的HDAC活力以及HDAC1和HDAC2 mRNA表达水平;提示氢醌引起的骨髓损伤与组蛋白乙酰化修饰水平改变有关。