【摘 要】
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目的探讨过氧化氢酶(CAT)基因重组腺病毒对晶状体氧化损伤进行基因治疗的可行性。方法克隆CAT基因,构建CAT基因重组腺病毒,测定病毒液滴度。体外培养大鼠晶状体,Western印迹
【机 构】
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汕头大学·香港中文大学联合汕头国际眼科中心,佳木斯大学附属第一医院眼科,汕头大学医学院分子生物中心,中国医科大学卫生部细胞生物学重点实验室,中国医科大学附属第一医院眼科 515041
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目的探讨过氧化氢酶(CAT)基因重组腺病毒对晶状体氧化损伤进行基因治疗的可行性。方法克隆CAT基因,构建CAT基因重组腺病毒,测定病毒液滴度。体外培养大鼠晶状体,Western印迹分析确定重组腺病毒感染大鼠晶状体后CAT表达峰值时间。按随机分组原则将大鼠晶状体分为对照组(A组)、H2O2处理组(B组)、H2O2及重组腺病毒处理组(C组),分别于6、12、18、24h检测晶状体透明度,并采用双染色流式细胞技术进行细胞凋亡分析。结果构建出具有生物学活性的CAT基因重组腺病毒。CAT基因重组腺病毒感染体外培养大鼠晶状体后9h,CAT表达达到峰值,并在36h内保持恒定。6、12、18、24h,C组晶状体的透明度均低于A组,高于B组,3组比较差异均有统计学意义(P<005);C组细胞凋亡率均高于A组,低于B组,3组比较差异均有统计学意义(P<005)。结论CAT基因重组腺病毒可抑制氧化剂导致的晶状体混浊和晶状体上皮细胞凋亡,具有用于治疗氧化所致白内障的可能性。
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