目的探讨酶联免疫吸附试验中普遍存在的操作问题采用质控方法研究的可行性。方法 94份血清标本均为HBcAb阴性,采用两种不同加样顺序对竞争抑制法存在的操作问题进行对比实验,观察其差异;对酶联免疫检测实验操作的关键步骤进行质控,以CEA检测试剂为例,回顾性将北京军区总医院中心实验室15个不同批次的CEA标准血清结果总结分析,计算批间变异系数;选CEA临界值血清数份,选取范围在5.0～5.5ng/ml,检测45个批次的平均值、标准差和变异系数。结果用两种不同顺序加样方法检测HBcAb的结果显示,两种方法有很大差异,交替加样法未见假阳性结果,而顺序加样法有17.02%(16/94)出现阳性反应,属于假阳性结果。两种不同加样顺利做出的结果有统计学意义(P<0.01)。CEA标准血清分为0,2,5,15,50,75ng/ml,对15个不同批次试剂盒所做的标准曲线统计处理,其620nm吸光度变异系数分别为11.8%、11.8%、9.22%、8.78%、8.46%和4.23%。该变异反映出实验室常规条件下的变异,操作者常规操作水平。临界值血清经过45次不同批次实验,其变异系数只有3.68%,均值±标准差为0.3633±0.0134。结论对酶联免疫试验中采用竞争抑制法的项目应采用交替加样法以便减少假阳性;对ELISA实验操作中的几个关键步骤进行质控,能够保证实验的准确性。