细粒棘球绦虫Eg95重组分泌型卡介苗的构建

来源 :中国寄生虫学与寄生虫病杂志 | 被引量 : 0次 | 上传用户:njbbbb
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目的构建细粒棘球绦虫Eg95重组分泌型卡介苗(rsBCG-Eg95)。方法分别以卡介苗BCG基因组DNA和pGEX-4T-Eg95重组质粒为模板,PCR扩增获117bp的BCG抗原85B(BCG-Ag85B)信号肽序列和471bp的Eg95基因序列。将这两个序列定向克隆至大肠埃希菌-BCG穿梭质粒pMV261,经酶切、PCR扩增及测序鉴定得到重组质粒pSMEg95。电穿孔法将重组质粒导入BCG菌构建rsBCG-Eg95疫苗,卡那霉素抗性基因筛选并经PCR扩增鉴定。结果质粒pSMEg95经双酶切、PCR扩增
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