【摘 要】
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目的 考察利用ITS序列进行药材藏菖蒲及其常见混伪品(石菖蒲、多被银莲花、岩白菜)特异性PCR鉴别的可行性,研究藏菖蒲和混伪品的ITS序列以及基于ITS序列构建的系统发育树.方法 在ITS条形码研究的基础上,为藏菖蒲设计了特异性PCR引物对ZCP-CP19s/CP19a.利用二步法反应进行扩增,并优化扩增条件,缩短鉴别反应时间,获得了特异性PCR反应程序.结果 在系统发育树中藏菖蒲聚成单系,应用该反应程序的实验结果发现,在PCR产物中,正品出现目的 条带,而混淆品不出现条带.结论 基于ITS序列设计的特异
【机 构】
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皖西学院,安徽六安237012;安徽省石斛产业化开发协同创新中心,安徽六安237012;皖西学院,安徽六安237012;中国中医科学院中药资源中心道地药材国家重点实验室培育基地,北京100700
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目的 考察利用ITS序列进行药材藏菖蒲及其常见混伪品(石菖蒲、多被银莲花、岩白菜)特异性PCR鉴别的可行性,研究藏菖蒲和混伪品的ITS序列以及基于ITS序列构建的系统发育树.方法 在ITS条形码研究的基础上,为藏菖蒲设计了特异性PCR引物对ZCP-CP19s/CP19a.利用二步法反应进行扩增,并优化扩增条件,缩短鉴别反应时间,获得了特异性PCR反应程序.结果 在系统发育树中藏菖蒲聚成单系,应用该反应程序的实验结果发现,在PCR产物中,正品出现目的 条带,而混淆品不出现条带.结论 基于ITS序列设计的特异性引物具有较高的特异性,能够快速、有效区分藏菖蒲及其混伪品.
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目的 该研究建立了样品在线提取HPLC-ABTS联用的方法快速分析小叶榕中的抗氧化活性成分.方法 小叶榕样品与硅藻土1:30混合后,取适量置于在线提取罐中,使用流动相进行在线提取.采用Agilent Zorbax SB-AQ C18色谱柱(4.6 mm×150 mm,5μm),0.2％乙酸-乙腈作为流动相,0.8 mL· min-1流速进行梯度洗脱,355 nm波长下检测提取液化合物;分离后的化合物与ABTS溶液混合反应,750 nm波长下在线检测其抗氧化活性化合物.结果 所建立的分析方法完成了小叶榕样品
目的 探索济阴颗粒干预女性冠心病的药效及作用机制.方法 雌性大鼠检测心电图后随机选择15只作为空白组,其余去除双侧卵巢,确定未出现动情期后随机分为模型组、西药对照组、中药对照组、济阴颗粒低、中、高剂量组,每组15只.采用灌胃给予高脂乳剂配合周期性注射垂体后叶素、盐酸肾上腺素和维生素D3方式建立冠心病模型.造模同时给予相应药物,空白组与模型组给予蒸馏水10ml/(kg·d)灌胃,连续8周.检测大鼠心电图ST段、T波,计算改变值;取血清检测心肌酶;取主动脉弓观察血管形态,免疫组织化学法检测GPR30、PPAR
目的 确定连翘归尾煎的提取工艺和颗粒剂的成型工艺.方法 以对人乳腺癌MCF-7和MDA-MB-231细胞增值的抑制作用为指导,以有效成分的转移率为指标,确定最佳的提取溶媒;采用正交试验,以出膏率和绿原酸、连翘酯苷A和连翘苷的转移率为指标,考察溶媒量、煎煮时间、煎煮次数、浸泡时间四因素对连翘归尾煎提取效果的影响,优化提取工艺;以成型率、溶化性、休止角为指标,考察辅料种类、配比以及润湿剂浓度对连翘归尾颗粒成型工艺的影响,优选最佳成型工艺.结果 最佳的乙醇提取浓度为20％;最佳提取工艺:12倍20％乙醇,浸泡4
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目的 合成橙皮素钒、锰、钴、镍、钼配合物5个中药新药,并研究它们的抗菌抗肿瘤活性和自由基清除能力.方法 采用弱碱条件合成得到橙皮素钒、锰、钴、镍、钼配合物,采用倍比稀释法测定橙皮素及其配合物对沙门氏菌等10种菌的抑制活性,采用MTI法测定橙皮素及其配合物对Ishikawa等6种肿瘤细胞增殖的影响,采用DPPH法测定橙皮素及其配合物对DPPH自由基的清除能力.结果 合成的橙皮素配合物配位比为2∶1或3∶1;小鼠急性毒性实验显示5个配合物均无明显毒性;配合物对10种菌的最小抑菌浓度MIC均低于橙皮素,抗菌活性
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目的 观察热敏灸对缺氧缺血性脑病新生小鼠脑组织细胞凋亡和Caspase-9表达的影响,以阐明热敏灸的作用机制.方法 选取50只7dICR新生小鼠,按完全随机的方法分为假手术组15只、模型组15只与艾灸治疗组20只.艾灸治疗组再根据艾灸前后小鼠的尾温变化,分为非热敏灸组8只(尾温未升高)和热敏灸组12只(尾温明显升高).采用TTC染色检测脑梗死情况;DAPI染色观察脑组织形态;TUNEL法检测脑组织凋亡细胞;免疫荧光染色检测脑组织Caspase-9表达.结果 与假手术组相比,模型组小鼠脑梗死面积增加,脑组织
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