METH1在酵母双杂交系统中的表达及对报告基因激活作用的检测

来源 :中国美容整形外科杂志 | 被引量 : 0次 | 上传用户：pgwork2011

【摘要】

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目的通过观察血管生成抑制因子METH1的cDNA片段在酵母双杂交中的表达及检测其对报告基因有无激活作用，为进一步明确METHI抑制增生性瘢痕的分子机制奠定基础。方法采用酵母双杂

【作者】

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彭湃张伟鲁开化张阳宋保强

【机构】

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第四军医大学西京医院整形外科,第四军医大学基础部微生物学教研室

【出处】

：

中国美容整形外科杂志

【发表日期】

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2007年2期

【关键词】

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METH1 酵母双杂交报告基因 METH1 Yeast double- Aybrid system Reporter gene

【基金项目】

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国家自然科学基金资助项目（30271346）

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目的通过观察血管生成抑制因子METH1的cDNA片段在酵母双杂交中的表达及检测其对报告基因有无激活作用，为进一步明确METHI抑制增生性瘢痕的分子机制奠定基础。方法采用酵母双杂交Ga14系统3，经PCR扩增子METH1的cDNA片段，分别克隆入pUC19质粒，经测序正确后。再分别亚克隆入酵母双杂交诱饵载体pGBKT7中。将重组质粒导入酵母菌AH109，检测其表达产物在酵母细胞中对报告基因的激活作用。结果成功获得METH1的cDNA片段，该片段所表达的蛋白对酵母菌AH109无毒性，且对报告基因无激活作用。结

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