小鼠α烯醇化酶基因真核表达载体的构建与鉴定

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目的构建小鼠α烯醇化酶(Enol)基因的真核表达载体。方法以健康小鼠肾脏组织细胞的cDNA为模板,采用聚合酶链式反应(PCR)扩增Enol基因编码区的全部序列,克隆至真核细胞表达载体pCDNA3.1+中,测序鉴定目的基因用阳离子脂质体转染的方法转染中国仓鼠卵巢CHO细胞。结果PCR扩增的特异性片段长度为1 304bp,以此构建重组质粒pCDNA3.1+-Enol,测序结果与Genbank中的鼠源Enol基因cDNA序列一致。转染中国仓鼠卵巢细胞后可检测到Enol蛋白的表达。结论构建的真核表达载体pCDNA3.1+-Enol可在真核细胞内正确表达,这为进一步的疫苗研究奠定了基础。
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