【摘 要】
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目的构建人类肥胖相关新基因LYRM1原核表达载体,并获取LYRM1重组蛋白。方法采用RT-PCR技术从人网膜脂肪组织中扩增出LYRM1基因的完整编码框,将其亚克隆到原核表达载体pGEX-6P
【机 构】
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南京医科大学附属南京儿童医院新生儿科,南京医科大学附属南京妇幼保健院儿科
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目的构建人类肥胖相关新基因LYRM1原核表达载体,并获取LYRM1重组蛋白。方法采用RT-PCR技术从人网膜脂肪组织中扩增出LYRM1基因的完整编码框,将其亚克隆到原核表达载体pGEX-6P-1,转化大肠杆菌BL21（DE3）,用异丙基-β-D-硫代板乳糖苷（IPTG）诱导LYRM1融合蛋白的表达,利用变性聚丙烯酰胺凝胶电泳（SDS-PAGE）及免疫蛋白印迹（Western blot）鉴定其表达。结果PCR、酶切鉴定及测序结果表明重组质粒构建正确。LYRM1基因在原核细胞中成功表达,经SDS-PAGE鉴定
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