一株灰葡萄孢细胞壁完整性缺陷突变株的分子鉴定和表型分析

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为探明灰葡萄孢细胞壁相关基因功能,用荧光增白剂CalcofluorWhite(CFW)从灰葡萄孢T-DNA插入突变体库中筛选细胞壁完整性缺陷突变株,发现一株突变株D-59对CFW的敏感性与野生型相比提高了2.8倍。通过TAIL—PCR扩增突变株的T—DNA插入位点的侧翼序列并对其进行序列分析表明,T—DNA插入于突变株BC1G_00770.1基因的外显子部位。RT—PCR的结果显示,D-59的BC1G_00770.1基因不表达。突变株D-59的表型分析表明,突变株的菌丝稀疏,菌落呈土黄色,产孢量明显下降,
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