【摘 要】
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在硅胶基质的反相填料(如C18、 C8、 C4等)上, 蛋白质的变性, 碱性分子峰展宽、拖尾甚至完全吸附等常被归因为硅羟基产生的次级效应(Secondary Effect)[1～3]. 我们认为, 除填
【机 构】
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中国科学院化学研究所,北京,100080
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在硅胶基质的反相填料(如C18、 C8、 C4等)上, 蛋白质的变性, 碱性分子峰展宽、拖尾甚至完全吸附等常被归因为硅羟基产生的次级效应(Secondary Effect)[1～3]. 我们认为, 除填料的孔径效应外[4], 杂质离子与残余硅羟基的协同效应是导致此类问题的直接原因, 如金属离子直接作用于溶质以及金属离子和硅羟基的远程作用力导致的溶质变性等. 为解决这一问题, 可采用高反应性的新硅烷化试剂, 以尽可能将硅羟基完全屏蔽[5],或以封端试剂消除残余的硅羟基. 但是, 用硅烷化试剂封端(End-capping)在多数情况下并不能完全覆盖表面硅羟基, 而且此种情况下的封端基团在色谱过程中很容易被洗脱下来[6]. 考虑到硅氧硅键(Si-O-Si)通常被认为是疏水性的[7～9], 因此本文应用后凝胶化反应形成硅氧硅键, 以掩蔽金属离子和硅羟基对溶质的远程效应, 消除其对碱性物质的非特异性吸附.
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