抑制差减杂交筛选严重烫伤大鼠免疫细胞差异基因

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目的探索严重烧伤后早期免疫细胞基因表达变化与烧伤后免疫功能紊乱的关系.方法分离严重烫伤F344雌性大鼠的外周血免疫细胞并提取mRNA,以烫伤前为对照进行抑制差减杂交筛选差异表达基因,将差异基因克隆后测序,与Genbank进行同源性比较. 结果分离的免疫细胞经检测基本为单核细胞及淋巴细胞,抑制差减杂交得到多个位于200~400 bp的条带,将它们克隆到pGEM-T质粒载体,构建了差异表达基因库.随机测序20个克隆,得到的基因与烧伤后机体改变相符,部分新基因序列在Genbank登录. 结论严重烧伤早期外周血免疫细胞的基因表达就有改变.构建了F344雌性大鼠的差异表达基因库,从中检出的部分基因可能对严重烧伤后的免疫功能紊乱有诱发作用.
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