【摘 要】
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目的探索基于常规PCR和定量PCR结合的方法对DNA完整性的评估。方法对来自于同一个人不同处理提取到完整性不同的DNA,使用看家基因短扩增片段的荧光定量PCR结果分析不同样本的
【机 构】
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中国人民解放军总医院医学创新研究部转化医学研究中心
【基金项目】
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国家重点研发计划(名称:新生儿遗传代谢病筛查诊断集成化产品自主研发,编号:2017YFC1001700)
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目的探索基于常规PCR和定量PCR结合的方法对DNA完整性的评估。方法对来自于同一个人不同处理提取到完整性不同的DNA,使用看家基因短扩增片段的荧光定量PCR结果分析不同样本的相对含量,用来对初始模板DNA进行相对定量和校正。对初始浓度为1 ng/μL的DNA进行梯度稀释,最高稀释64倍。对梯度稀释后的DNA模板进行长片段的扩增,目标片段为约1.8 kb、3.1 kb和3.5 kb,使用琼脂糖电泳检验扩增条带的大小和亮度。结果短片段定量PCR分析结果表明相同初始模板量不同完整性样本之间CT值无显著性差异。
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