【摘 要】
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为研究匍枝根霉(Rhizopus stolonifer)TP-02中碳代谢阻遏因子CRE对其产纤维素酶的调控特性,从其基因组DNA中扩增得到CRE全长基因,并利用重叠PCR(overlapping PCR)技术将潮霉素B抗性基因(hyg B)插入其中,既破坏cre正常转录又提供了筛选标记。通过电转化将p UCmT-cre-hyg B导入匍枝根霉萌发孢子,经抗性筛选得到△CRE突变株。利用RT-q
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为研究匍枝根霉(Rhizopus stolonifer)TP-02中碳代谢阻遏因子CRE对其产纤维素酶的调控特性,从其基因组DNA中扩增得到CRE全长基因,并利用重叠PCR(overlapping PCR)技术将潮霉素B抗性基因(hyg B)插入其中,既破坏cre正常转录又提供了筛选标记。通过电转化将p UCmT-cre-hyg B导入匍枝根霉萌发孢子,经抗性筛选得到△CRE突变株。利用RT-q PCR对此突变株纤维素酶基因转录水平进行研究,发现eg、bg、cbh1和cbh2的转录均有所提高,分别为
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