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目的构建针对细胞周期素D1(cyclinD1,由CCND1基因编码)的shRNA表达载体,筛选出有效序列,观察其对肺腺癌A549细胞增殖的影响。方法设计针对cyclinD1基因编码区的3条寡核苷酸链,体外退火后克隆入干扰载体Pgenesil-1中,对重组质粒进行酶切分析和DNA序列测定。以脂质体法将空载体Pgenesil-1-K和3个重组质粒Pgenesil-1-CCND11、Pgenesil-1-CCND12、Pgenesil-1-CCND13分别导人549肺腺癌细胞,48h后用Real time PC