【摘 要】
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目的 探讨微小核糖核酸-497(miR-497)在小鼠骨髓间充质干细胞(BMSCs)向心肌样细胞分化中的作用及机制.方法 将BMSCs分为4组:空白组(未作任何处理)、阳性对照组(5-氮杂胞嘧啶8
【机 构】
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江西医学高等专科学校 基础医学部,江西上饶,334000;江西省人民医院 心血管内科,江西 南昌,330000
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目的 探讨微小核糖核酸-497(miR-497)在小鼠骨髓间充质干细胞(BMSCs)向心肌样细胞分化中的作用及机制.方法 将BMSCs分为4组:空白组(未作任何处理)、阳性对照组(5-氮杂胞嘧啶8 μmol·L-1体外诱导24 h)、阴性对照组(转染 mimics-NC 序列)和 miR-497 mimics 组(转染 miR-497 mimics序列).以蛋白质印迹法检测 Notch1、Delta样配体1(DII-1)蛋白表达水平(灰度值),以AnnexinV-FTTC/PI双染法检测BMSCs凋亡率.结果 空白组、阳性对照组、阴性对照组和miR-497mimics转染组的Notch1蛋白表达量分别为1.34 ± 0.27,0.75 ± 0.20,1.28 ± 0.29和0.62 ± 0.17;这4组的DII-1蛋白表达量分别为0.67 ± 0.15,0.44 ± 0.13,0.62 ± 0.15和0.32 ± 0.09,阳性对照组和miR-497mimics组与空白组比较,Notch1、DII-1蛋白表达量均明显降低,差异均有统计学意义(均P＜0.05);miR-497mimics组与阳性对照组和阴性对照组比较,这2种蛋白的差异均有统计学意义(均P＜0.05).在转染72 h,上述4组 BMSCs 凋 亡 率 分 别 为(24.86 ± 5.77)％,(56.93 ± 15.82)％,(28.47 ± 8.36)％和(33.59 ± 8.25)％,阳性对照组、阴性对照组和 miR-497mimics组与空白组比较,凋亡率均明显升高,差异均有统计学意义(均P＜0.05);miR-497mimics组与阳性对照组比较,凋亡率的差异有统计学意义(P＜0.05).结论 上调BMSCs中miR-497的表达,可通过抑制Notch信号通路,激活诱导骨髓间充质干细胞向心肌样细胞分化,巨诱导分化能力和安全性均优于5-氮杂胞嘧啶.
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