双重PCR检测黄秋葵储藏期间青霉和链格孢菌条件的优化

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以黄秋葵为材料,分离纯化在贮藏过程中引起腐烂的主要病原真菌青霉和链格孢菌。根据基因库上的序列,针对青霉和链格孢菌在18SRNA的序列设计2对引物,建立了用于检测黄秋葵青霉和链格孢菌双重PCR检测方法,并对PCR扩增条件进行了优化,优化条件如下:引物Alt4、Alt5和PenF’、PenR的比例为2∶1、退火温度为52℃、Mg^2+浓度为2.5mmol/L、d NTP浓度为0.08mmol/L、循环数为35、延伸时间为50s、退火时间为30s。结果表明,该方法灵敏度较高、特异性强。该试验可以为黄秋葵在储藏期
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