【摘 要】
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目的证实苯乙基异硫氰酸酯(phenethyl isothiocyanate,PEITC)诱导人急性髓系白血病(AML)M2白血病细胞系Kasumi-1细胞凋亡的效应,初步探讨PEITC诱导Kasumi-1细胞凋亡的机制。
【机 构】
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贵州省造血干细胞移植中心,贵阳医学院附属医院血液科,贵州省血液病诊疗质控中心实验室,贵阳医学院附属医院临床生化科
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目的证实苯乙基异硫氰酸酯(phenethyl isothiocyanate,PEITC)诱导人急性髓系白血病(AML)M2白血病细胞系Kasumi-1细胞凋亡的效应,初步探讨PEITC诱导Kasumi-1细胞凋亡的机制。方法培养人M2白血病细胞株Kasumi-1细胞,CCK-8法检测不同浓度PEITC处理后Kasumi-1细胞的增殖抑制率;流式细胞术检测药物诱导细胞凋亡和活性氧(reactive oxygen species,ROS)生成的情况;Real-time PCR及Western blot检测HO-1以及凋亡相关基因caspase3、caspase8、caspase9mRNA及蛋白水平的变化。结果 CCK-8结果显示PEITC作用Kasumi-1细胞24h、48h、72h后,细胞增殖抑制率呈现浓度-时间依赖性。流式细胞术显示PEITC能够诱导Kasumi-1细胞的凋亡。Real-time PCR及Western blot结果显示PEITC处理细胞后,HO-1表达下降,而凋亡相关基因Caspase3、Caspase8、Caspase9的表达上调。DCFH-DA探针法显示PEITC作用Kasumi-1细胞后,ROS生成增多。结论 PEITC能够促进Kasumi-1细胞凋亡,呈时间剂量梯度依赖关系;PEITC诱导Kasumi-1细胞凋亡可能通过的机制包括下调HO-1表达促进ROS生成及凋亡相关基因Caspase3、Caspase8、Caspase9的激活。
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