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目的
探讨人源性胎盘间充质干细胞(HPMSCs)能否用于体外扩增角膜缘干细胞(LSCs)并维持其干细胞特性。
方法实验研究。对2015年10月至2016年6月在新疆眼科大学临床学院行体外分离培养HPMSCs并行成脂、成骨和细胞表面标志鉴定;兔LSCs与HPMSCs、NIH-3T3共培养并计算比较各组克隆形成率(CFE);免疫荧光检测两组LSCs克隆团干细胞特性表达情况。
结果体外培养HPMSCs具有成脂和成骨潜能;高表达CD29、CD44,不表达CD34、CD45、HLA-DR;与兔LSCs共培养8天后,两种饲养组均可形成较大LSCs克隆团,HPMSCs、NIH-3T3饲养组以及无饲养层组LSCs的CFE为(3.02±0.73)%、(4.11±0.69)%、(0.24±0.08)%,三组间总体差异有统计学意义(F=34.87,P<0.01);HPMSCs饲养组与NIH-3T3饲养组的CFE差异无统计学意义(t=2.27,P>0.05);HPMSCs、NIH-3T3饲养组与无饲养细胞组间均差异有统计学意义(t=5.82、8.10,P<0.01)。免疫荧光化学检测两种饲养层LSCs克隆团标志物,IPO13均呈高表达,CK3/12呈低表达,各饲养组干细胞标志物表达情况无显著差异。
结论HPMSCs能扩增LSCs并维持其干细胞特性,可作为替代3T3的理想饲养层。