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在pH1.0-3.0的条件下,曙红Y与氯霉素反应生成红色离子缔合物,其最大显色波长和褪色波长分别位于483nm和560nln,表观摩尔吸光系数分别为4.49×10^4和1.20×104L·mol-1·cm-1,当用双波长叠加法测定时,表观摩尔吸光系数可提高到5.70×104 L·mol-1·cm-1,在0.15~6.5mg·Lq范围内,显色反应或褪色反应的吸光度绝对值与溶液中氯霉素浓度成正比,由此建立了测定氯霉素的吸收光谱法。