【摘 要】
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目的 探讨沉默细胞因子信号抑制因子1(SOCS1)基因对人树突状细胞(hDC)生物学特征和功能的影响.方法 实验分为RNA干扰组、阴性对照组和空白对照组.应用慢病毒介导的RNA干扰技
【机 构】
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中山市博爱医院肿瘤科,广东中山528400;南方医科大学南方医院临床医学实验研究中心,广东广州510515
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目的 探讨沉默细胞因子信号抑制因子1(SOCS1)基因对人树突状细胞(hDC)生物学特征和功能的影响.方法 实验分为RNA干扰组、阴性对照组和空白对照组.应用慢病毒介导的RNA干扰技术沉默hDC的SOCS1基因表达,Western blot法检测基因沉默效果.采用系列细胞因子诱导DC成熟,流式细胞术检测分析各组DC细胞表面分子CD80、CD83、CD86、HLA-DR、PD-L1的表达情况;ELISA法检测各组DC细胞培养上清中细胞因子白细胞介素10(IL-10)、白细胞介素12(IL-12) p70及肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的分泌水平.结果 SOCS1基因shRNA干扰慢病毒(LV-shRNA-SOCS1)感染DC后,可有效下调DC中SOCS1表达水平;与空白对照组和阴性对照组相比,RNA干扰组DC表面分子CD80、CD83、CD86和HLA-DR的阳性表达率均显著增高(P＜0.05),而PD-L1的阳性表达率显著下降(P＜0.05);DC细胞培养上清中细胞因子IL-12 p70及TNF-α的分泌水平均显著增高(P＜0.05),IL-10的分泌水平显著下降(P＜0.05).结论 慢病毒介导的RNA干扰能够有效沉默hDC的SOCS1表达,从而促进DC的成熟和活化,有利于促进DC刺激Th1型免疫反应.
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