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目的
探讨10 Hz超低频磁场(ELF-EMF)对离体培养大鼠骨髓间充质干细胞(BMSCs)向神经元样细胞分化的影响及其作用机制。
方法应用全骨髓贴壁法分离培养大鼠BMSCs,流式细胞仪检测P3代细胞表面标记物。将P3代BMSCs分为ELF-EMF组、ELF-EMF+抑制剂组、抑制剂组及对照组,给予诱导培养基(含2%二甲基亚砜和200 μmol/L丁基羟基茴香醚)诱导培养5 h,诱导过程中ELF-EMF组、ELF-EMF+抑制剂组给予10 Hz、500 GS ELF-EMF干预,ELF-EMF+抑制剂组、抑制剂组在诱导前预先加入50 μmol/L U0126共培养30 min,使用倒置显微镜观察细胞形态学变化。应用免疫荧光染色及Western blotting检测各组细胞巢蛋白表达,应用Western blotting检测各组细胞内磷酸化细胞外信号调节激酶1/2(p-ERK1/2)蛋白表达水平。
结果P3代BMSCs呈长梭形,漩涡样排列,CD90表达率为97.9%,CD45表达率为4.7%。诱导结束后细胞均逐渐出现典型的神经元样细胞形态学特征。免疫荧光染色及Western blotting检测结果显示,与对照组、ELF-EMF+抑制剂组及抑制剂组比较,ELF-EMF组巢蛋白、p-ERK1/2表达水平均明显增高,差异均有统计学意义(P<0.05)。ELF-EMF+抑制剂组巢蛋白表达水平与对照组及抑制剂组比较差异均无统计学意义(P>0.05)。
结论ELF-EMF可通过活化ERK1 /2信号转导通路,促进BMSCs向神经元样细胞分化。