【摘 要】
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目的:克隆扣囊复膜孢酵母的β-葡萄糖苷酶基因 (BGL1),为β-葡萄糖苷酶基因的表达作准备.方法:用PCR方法从扣囊复膜孢酵母的总DNA中扩增得到β-葡萄糖苷酶基因连接到pGEM-T载
【机 构】
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山东省医药生物技术研究中心国家卫生部生物技术药物重点实验室,中科院微生物研究所,延边大学医学院
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目的:克隆扣囊复膜孢酵母的β-葡萄糖苷酶基因 (BGL1),为β-葡萄糖苷酶基因的表达作准备.方法:用PCR方法从扣囊复膜孢酵母的总DNA中扩增得到β-葡萄糖苷酶基因连接到pGEM-T载体上,用限制性内切酶切下目的基因,插入到巴斯德毕赤酵母表达载体pPIC9K中,使之位于α-因子信号肽下游,且与之同框, 构建成重组质粒pSHL9K.再将β-葡萄糖苷酶基因在大肠杆菌和巴斯德毕赤酵母中进行克隆,并进行鉴定.结果:重组pPIC9K转化大肠杆菌和巴斯德毕赤酵母后,进行酶切和PCR鉴定,证明形成了目的基因的克隆.结
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