【摘 要】
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4-香豆酰辅酶A连接酶（4-coumarate-Co A ligase,4CL）和芪合酶（stilbene synthase,STS）是白藜芦醇苯丙氨酸代谢合成的最后两个关键酶。运用悬挂PCR（overlap PCR）的方法将烟草4CL基因
【机 构】
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北京农学院植物科学技术学院,北京农学院生物科学与工程学院
【基金项目】
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国家自然科学基金(31300620;31370674);北京市自然科学基金重点项目(5111001);北京市教委面上项目(KM201310020002;KM201310020015;KM201110020001;KM201210020009);北京市属高校人才强教深化计划项目(PHR201108279)资助
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4-香豆酰辅酶A连接酶（4-coumarate-Co A ligase,4CL）和芪合酶（stilbene synthase,STS）是白藜芦醇苯丙氨酸代谢合成的最后两个关键酶。运用悬挂PCR（overlap PCR）的方法将烟草4CL基因（Nt4CL）和虎杖STS基因（Pc PKS5）用3个中性氨基酸链连接,得到融合基因Nt4CL-Pc PKS5,将其插入原核表达载体中,构建p ET30a-Nt4CL-Pc PKS5重组质粒,表达Nt4CL-Pc PKS5融合蛋白。经Ni2＋纯化和PD-10柱脱盐后,得
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