人肝细胞生长因子cDNA的克隆及其在Pichia系统中的表达

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采用RT-PCR方法以胎肝mRNA为模拟克隆人肝细胞生长因子全长cDNA,核苷酸序列分析证实比文献报道多2个氨基酸编码序列。经与Pichia分泌型表达载体pPIC9重组,表达质粒转化GS115细胞,mut^+表型筛选,经甲醇诱导实现了hHGF在Pichia Pastoris酵母系统中分泌型表达,SDS-PAGE电泳,银染法分析证实表达产物分子量为80 ̄85kD左右,具有刺激肝细胞增殖活性。
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