【摘 要】
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目的探讨转化生长因子β2反义寡核苷酸 (TGF-β2ASON) 在兔角膜创伤愈合过程中对瘢痕组织形成的作用。方法实验研究。新西兰大白兔192只,以随机数字表法,随机分为4组 (A组、B组、C组、D组),每组实验动物48只。4组动物右眼均制备角膜穿孔伤模型。A组术后右眼滴TGF-β2ASON溶液 (TGF-β2ASON组) ;B组术后右眼滴地塞米松滴眼液 (地塞米松组) ;C组术后右眼滴去离子水 (
【机 构】
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目的探讨转化生长因子β2反义寡核苷酸 (TGF-β2ASON) 在兔角膜创伤愈合过程中对瘢痕组织形成的作用。
方法实验研究。新西兰大白兔192只,以随机数字表法,随机分为4组 (A组、B组、C组、D组),每组实验动物48只。4组动物右眼均制备角膜穿孔伤模型。A组术后右眼滴TGF-β2ASON溶液 (TGF-β2ASON组) ;B组术后右眼滴地塞米松滴眼液 (地塞米松组) ;C组术后右眼滴去离子水 (去离子水组),D组术后右眼不做任何处理 (单纯手术组) 。4组动物分别于术后4、7、14、28 d取角膜组织,应用HE染色、免疫组织化学和荧光定量PCR等检测方法进行观察。多组间比较采用单因素方差分析,两两比较采用Bonferroni检验。
结果HE染色:术后同一时间点A组与B组阳性成纤维细胞数均比C组和D组明显减少,差异具有统计学意义 (F=510.79,178.12,79.14,P<0.05),但A组与B组、C组与D组间对比差异无统计学意义 (P>0.05) 。免疫组织化学观察: (1) α-平滑肌肌动蛋白 (α-SMA) :A组的α-SMA染色阳性的成纤维细胞于术后4 d开始增生 (9.44±0.47个/高倍镜视野),7 d达高峰 (12.50±0.81个/高倍镜视野),14 d回到基线水平 (0.85±0.43个/高倍镜视野),同一时间点与B组 (9.49±0.95,12.42±0.70,0.86±0.79个/高倍镜视野) 相比差异无统计学意义 (P>0.05),与C组 (20.14±0.78,18.19±1.28,4.87±0.58个/高倍镜视野) 和D组 (20.21±0.92,18.25±1.39,5.00±2.217个/高倍镜视野) 相比均明显减少,差异具有统计学意义 (P<0.05) ; (2) 纤维连接蛋白:同一时间点,A、B组纤维连接蛋白染色强度较C、D组明显减弱。逆转录实时荧光PCR:A、B组各时间点TGF-β2的mRNA相对表达量均较C、D组明显降低,差异均有统计学意义 (F=554.25,610.68,636.80,89.51,P<0.05),但A组与B组、C组与D组间比较差异均无统计学意义 (P>0.05) 。
结论TGF-β2ASON可有效抑制TGF-β2的活性,减轻角膜损伤后结缔组织的增生而发挥抗瘢痕化的作用。在角膜损伤修复的早期,即术后7 d内用TGF-β2ASON进行干预调控是抑制术后瘢痕增生的关键。 (中华眼科杂志,2013,49:163-169)
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