【摘 要】
：
目的:构建硫氧还蛋白-(His)6-瑞替普酶融合表达载体,提高瑞替普酶在大肠杆菌中的表达量,简化rPA的分离纯化.方法:将rPA基因克隆于原核表达载体pET32a硫氧还蛋白-(组氨酸)6标
论文部分内容阅读
目的:构建硫氧还蛋白-(His)6-瑞替普酶融合表达载体,提高瑞替普酶在大肠杆菌中的表达量,简化rPA的分离纯化.方法:将rPA基因克隆于原核表达载体pET32a硫氧还蛋白-(组氨酸)6标签下游,在大肠杆菌BL21(DE3)中用乳糖进行诱导表达.采用一步稀释法对融合蛋白体外复性后,使用Ni2+亲和层析柱,对包涵体复性液进行初步纯化.采用体外溶圈法对复性后和纯化后的融合蛋白进行生物活性的测定.结果:得到分子量约为56 kDa的融合蛋白,表达量达到总蛋白的30%以上.比本实验室构建的非融合表达载体表达量提高了
其他文献
目的:构建能高效表达长因子β3(TGF-β3)的基因工程菌.方法:用PCR方法扩增人转化生长因子β3的cDNA,将该cDNA片段插入表达载体pET3c的表达框架中,构建了表达菌株BL21/pET-TGF
目的:从合成的77个新化合物中经过生物活性筛选后得到新内皮素受体拮抗剂CPU 0213.方法:采用功能性抑制大鼠去内皮胸主动脉收缩及心肌ETA、ETB亚型放射受体结合实验.结果:CPU
14元环大环内酯抗生素红霉素A(Erythromycin A,1)是广泛应用的口服抗生素.然而,在胃酸条件下,红霉素会很快被降解为无活性的降解产物,从而降低了红霉素的生物利用度[1].因此,
目的:大规模培养具有高活力核苷磷酸化酶的产气肠杆菌突变株(E. aerogenes EAM-Z1),利用静息细胞酶法合成抗肿瘤核苷药物中间体5-氟尿苷(FUR).方法:补料分批培养产气肠杆菌,
肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(TRAIL)是TNF超家族成员,它与死亡受体(death receptor,DR)结合,启动细胞内信号途径,特异性诱导肿瘤细胞等凋亡,一般不对机体正常组织产生毒性
国家理科基础科学研究与教学人才培养基地 该基地是国家教育部为了加快发展国家科学技术和教育事业，迎接新技术革命的挑战，加强基础科学研究和教学人才的培养而设立的。中国药
目的:研究制剂因素对N-三甲基壳聚糖盐酸盐包覆胰岛素脂质体降血糖作用的影响.方法:采用逆相蒸发法制备胰岛素脂质体,用N-三甲基壳聚糖盐酸盐对胰岛素脂质体进行包覆.以小鼠
目的:建立毕赤酵母(pichia)高密度表达的重组水蛭素(recombinant hirudin-2,rHV2)分离纯化工艺.方法:高密度培养重组毕赤酵母并诱导表达水蛭素至胞外,发酵液经超滤、透析、离