论文部分内容阅读
目的初步探讨内质网应激PERK-ATF4-CHOP通路在褪黑素抵抗血管紧张素Ⅱ(angiotensinⅡ,AngⅡ)诱导的心肌细胞肥厚中的作用。方法将培养的心肌细胞随机分为对照组、AngⅡ处理组、褪黑素组。采用乳酸脱氢酶(lactate dehydrogenase,LDH)法检测细胞活性,原位切口末端标记法(TUNEL)检测细胞凋亡率,Western blot检测蛋白激酶R样内质网激酶(protein kinase r-like endoplasmic reticulum kinase,PERK)、活性转录因子(Activating Transcription Factor,ATF)4、C/EBP同源蛋白(C/EBP homologous protein,CHOP)的表达水平,实时荧光定量聚合酶链反应(quantitative real-time polymerase chain reaction,qRT-PCR)检测心肌肥厚相关标识物心房钠尿肽(atrial natriuretic peptide,ANP)、脑钠尿肽(brain natriuretic peptide,BNP)和心肌β-肌球蛋白重链(β-myosin heavy chain,β-MHC)mRNA表达量的变化;免疫荧光检测心肌细胞横截面积。结果与对照组相比,AngⅡ能够刺激心肌细胞上调ANP、BNP和β-MHC表达(P<0.05),刺激LDH释放(P<0.05)、增加细胞凋亡比率和心肌细胞横截面积(P<0.05);与AngⅡ组相比,褪黑素可以浓度依赖性显著抑制AngⅡ诱导的ANP、BNP和β-MHC的上调和LDH的积累,抑制心肌细胞的横截面积增加,降低细胞凋亡,并抑制诱导的PERK-ATF4-CHOP通路的激活(P<0.05);与对照组相比,AngⅡ显著增加PERK、ATF4和CHOP的表达水平(P<0.05),但给予褪黑素后,激活的PERK-ATF4-CHOP则被明显抑制(P<0.05)。结论褪黑素可能通过抑制内质网应激PERK-ATF4-CHOP信号通路激活,改善AngⅡ诱导的乳鼠心肌细胞肥厚,为未来褪黑素的进一步临床研究拓展新思路。