猪细小病毒SY-99株非结构蛋白NSl基因的克隆与原核表达

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根据猪细小病毒(porcine parvovirus,PPV)NADL-2株非结构蛋白基因NSl序列设计引物,扩增出了PPV SY-99株的NSI基因,将其克隆到原核表达载体pET28a中,得到重组质粒SYNSl/pET28a。将SYNSl/pET28a转化到大肠杆菌BL21(DE3)中,经IPTG诱导,使PPVNSl基因获得了表达,运用ELISA和Western blotting证实了表达产物的特异性。经表达产物细胞定位分析,表达的NSl蛋白是以包涵体的形式存在于大肠杆菌中。通过改变诱导时间或诱导剂IP
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