【摘 要】
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目的 探讨微小RNA（miR）-221对非小细胞肺癌（NSCLC）移植瘤模型小鼠肿瘤细胞增殖、迁移及侵袭的影响，初步分析其通过靶向组织金属蛋白酶抑制因子2（TIMP-2）调控Akt/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白（mTOR）信号通路对NSCLC模型小鼠肿瘤细胞可能的作用机制。方法 将A549细胞分为对照组、模拟物（mimic）组、TIMP-2组和Mimic+TIMP-2组。Mimic组和TIMP-2组分别
【基金项目】
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河北省高等学校科学技术研究青年基金（QN2019324）； 邢台市科技计划项目（2018ZC096）；
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目的 探讨微小RNA（miR）-221对非小细胞肺癌（NSCLC）移植瘤模型小鼠肿瘤细胞增殖、迁移及侵袭的影响，初步分析其通过靶向组织金属蛋白酶抑制因子2（TIMP-2）调控Akt/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白（mTOR）信号通路对NSCLC模型小鼠肿瘤细胞可能的作用机制。方法 将A549细胞分为对照组、模拟物（mimic）组、TIMP-2组和Mimic+TIMP-2组。Mimic组和TIMP-2组分别转染miR-221 mimic以及TIMP-2过表达质粒。Mimic+TIMP-2组同时转染miR-221 mimic和TIMP-2过表达质粒。对照组转染等量的阴性对照质粒。转染后，将各组的细胞在左前肢经皮下注射，从而构建相应的4组NSCLC小鼠模型。通过免疫组织化学染色检测增殖蛋白（Ki67）水平以测定其对细胞增殖的影响。通过Western blotting检测和比较各组基质金属蛋白酶2（MMP-2）和N-钙黏蛋白（N-cadherin）的蛋白表达评估细胞的迁移和侵袭能力。通过Real-time PCR或Western blotting检测骨髓和肿瘤组织中miR-221、TIMP-2和Akt/mTOR通路的水平。结果 当共同转染野生型（WT）-TIMP-2和miR-221 mimic后，细胞中的相对荧光素酶活性显著降低（P＜0.05）。与对照组比较，mimic组的肿瘤组织质量、体积、Ki67、MMP-2和N-cadherin表达水平，miR-221和Akt/mTOR通路水平显著升高，而TIMP-2 mRNA和蛋白水平显著降低（P＜0.05）。与对照组比较，TIMP-2组的TIMP-2 mRNA和蛋白水平显著升高，而其余指标显著降低（P＜0.05）。Mimic+TIMP-2组的肿瘤组织质量、体积、Ki67、MMP-2和N-cadherin蛋白表达水平及miR-221、Akt/mTOR通路水平显著低于mimic组且显著高于TIMP-2组，而TIMP-2 mRNA和蛋白水平显著高于mimic组且显著低于TIMP-2组（P＜0.05）。结论 MiR-221可能通过靶向抑制TIMP-2蛋白介导Akt/mTOR信号途径，促进NSCLC细胞增殖、迁移和侵袭能力。
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