【摘 要】
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目的 研究羧甲基茯苓多糖(carboxymethylpachymaran,CM P)对前列腺癌细胞周期的影响.方法 利用四甲基偶氮唑盐[3-(4,5)-dimethylthiahiazo(-z-y1)-3,5-di-phenytetrazoliumro
【机 构】
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430070 湖北武汉,中部战区总医院检验科;430070 湖北武汉,中部战区总医院泌尿外科;430070 湖北武汉,中部战区总医院输血科
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目的 研究羧甲基茯苓多糖(carboxymethylpachymaran,CM P)对前列腺癌细胞周期的影响.方法 利用四甲基偶氮唑盐[3-(4,5)-dimethylthiahiazo(-z-y1)-3,5-di-phenytetrazoliumromide,MTT]检测筛选出1、10、50、100、250、500、1000μg/ml的CM P对PC-3细胞作用的IC50值,并选出最佳抑制的作用时间点及所对应的CM P浓度.将PC-3细胞随机分为5组:对照组,低、中、高剂量组,阳性对照组.采用Hoechst 33258染色检测细胞形态变化,流式细胞术检测CMP对前列腺癌细胞周期的影响,Western blot检测各组细胞周期相关蛋白Cyclin A、Cyclin D1、CDK2的表达,反转录-聚合酶链反应(reverse transcription polymerase chain reaction,RT-PCR)检测Cyclin A、Cyclin D1、CDK2 mRNA的表达水平.结果 利用M T T法检测不同浓度CM P对PC-3细胞的抑制作用后,选择48 h为后续实验的作用时间点,108.7μg/ml作为后续实验中剂量组的干预剂量.Hoechst 33258染色显示,对照组胞核呈椭圆形,呈淡蓝色,凋亡细胞较少,而其余各组出现胞核缩小,染色质边集,呈亮蓝色.与对照组相比,低、中、高剂量组及阳性对照组细胞的G0/G1期细胞增多,G2/M期细胞减少,Cyclin A、Cyclin D1、CDK2的表达水平降低(P<0.01).结论 CMP对前列腺癌细胞周期具有抑制作用,其机制可能与抑制细胞周期相关蛋白Cyclin A、Cyclin D1、CDK2的表达有关.
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