【摘 要】
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目的:基于Wnt/β-catenin途径探索苦参碱抑制人宫颈癌细胞系Caski细胞侵袭迁移的分子机制.方法:Caski细胞用不同浓度苦参碱处理后,MTT法检测细胞增殖抑制情况;Transwell小室
【机 构】
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兰州大学第二医院妇科,甘肃兰州730000;兰州大学第二医院麻醉科,甘肃兰州730000
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目的:基于Wnt/β-catenin途径探索苦参碱抑制人宫颈癌细胞系Caski细胞侵袭迁移的分子机制.方法:Caski细胞用不同浓度苦参碱处理后,MTT法检测细胞增殖抑制情况;Transwell小室侵袭迁移实验检测细胞侵袭迁移情况;ELISA法检测细胞基质金属蛋白酶9(matrix metalloproteinase 9,MMP-9)和血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)的分泌变化;实时荧光定量PCR检测细胞糖原合成酶激酶3β(glycogen synthase kinase 3β,GSK-3β)、Wnt2B蛋白的表达情况;免疫蛋白印迹检测细胞β连环蛋白(β-catenin)、磷酸化β连环蛋白(p-β-catenin)含量.结果:苦参碱对Caski细胞的增殖具有抑制作用(P＜0.05),且呈现时间、浓度依赖性;苦参碱抑制Caski细胞的侵袭迁移率(P＜0.05),对Caski细胞分泌MMP-9、VEGF的能力具有显著抑制作用(P＜0.05);苦参碱可显著降低Caski细胞Wnt2B mRNA的表达及β-catenin的蛋白含量,增加Caski细胞中GSK-3β mRNA的表达和p-β-catenin的蛋白含量.结论:苦参碱通过促进Caski细胞Wnt/β-catenin通路中GSK-3β mRNA表达,提高p-β-catenin蛋白含量,降低Wnt2B mRNA表达、β-catenin蛋白含量以及Caski细胞内MMP-9、VEGF的分泌,进而抑制Caski细胞的侵袭迁移.
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