【摘 要】
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目的 探讨成人外周血循环来源的内皮祖细胞不同克隆成分表型特点及体内外血管生成差异.方法 密度梯度离心法获得单个核细胞,用含生长因子的内皮培养基接种于纤维连接蛋白包被
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目的 探讨成人外周血循环来源的内皮祖细胞不同克隆成分表型特点及体内外血管生成差异.方法 密度梯度离心法获得单个核细胞,用含生长因子的内皮培养基接种于纤维连接蛋白包被的培养板中.7 d后计数早期克隆并进行下面实验,另1份持续培养直到晚期克隆出现进行相同实验.流式细胞术检测细胞表面抗原,间接荧光染色法鉴定细胞表达假血友病因子.胶原凝胶细胞体外种植及裸鼠体内移植实验分别测定体外及体内血管生成功能.结果 早期克隆再种植不能形成第二代克隆且无体内外血管形成功能,细胞表面主要表达CD14和CD45.晚期克隆在培养21～28 d间出现,再种植可形成第二代内皮细胞克隆,并能在体外和裸鼠体内胶原凝胶中形成管腔样结构,细胞表达CD45和CD14显著减少(P＜0.001)而CD146明显增加(P＜0.01).结论 人外周血单个核细胞在内皮培养条件下可形成早期克隆和晚期克隆,只有晚期克隆表现出干/祖细胞和内皮细胞双重表型特征并具有体内外血管生成功能.
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