粗毛纤孔菌糖苷水解酶5基因克隆及蛋白质结构分析

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【目的】克隆得到粗毛纤孔菌糖苷水解酶5基因,并对该基因进行生物信息学分析、蛋白质原核表达和酶活研究,为糖苷水解酶的利用提供依据。【方法】分离纯化粗毛纤孔菌,并于 PDA斜面长期保存。应用 TRIzol提取粗毛纤孔菌总 RNA,通过 AMV反转录系统将 RNA 反转录成 cDNA,构建 cDNA 文库;应用 NCBI BLAST 分析并检测糖苷水解酶基因家族5阳性序列,RACE法克隆基因全长命名为 IhGH5-1并提交 NCBI注册; ORF-Finder分析IhGH5-1基因开放阅读框,推导出氨基酸序列;
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