低氧对人胚胎干细胞多能性维持及印迹基因表达稳定性的影响

来源 :中华生物医学工程杂志 | 被引量 : 0次 | 上传用户:nsitbay
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读

目的 研究低氧对人胚胎干细胞(hESC)生物学特性维持及印迹基因表达状态的影响.方法 在低氧(5%O2)条件下持续培养FY-hES-7细胞并采用细胞免疫荧光染色、RT-PCR等方法对其胚胎干细胞特性进行鉴定.运用全基因组基因表达谱芯片技术及实时荧光定量PCR方法检测FY-hES-7早期(第32代)和晚期(第52代)细胞的55个印迹基因表达状态.所有检测同时以常氧(21% O2)培养作为对照.结果 低氧条件下长期培养的FY-hES-7细胞具有和常氧条件下培养相似的生物学特性,阳性表达干细胞表面标志SSEA-3、SSEA-4、TRA- 1-60、TRA-1-81及碱性磷酸酶(AKP),但细胞克隆形态较常氧培养下典型,且未分化状态保持时间较常氧条件下更长.低氧长期培养后FY-hES-7细胞的55个印迹基因中,有15个印迹基因(27.27%)表达发生了变化(上调8个,下调7个),而常氧培养后则有39个印迹基因表达水平有变化(70.91%)(上调21个,下调18个),氧浓度对印迹的影响差异具有统计学意义(P<0.05).结论 低氧更有利于hESC生物学特性的维持.长期培养能对hESC的印迹表达产生影响,但低氧培养条件下hESC的印迹稳定性要明显好于常氧培养。

其他文献
目的 应用超声靶向微泡破坏技术(UTMD)和核因子κB(NF-κB)结合基序分别促进人基质细胞衍生因子-1α(SDF-1α)质粒进入细胞质和细胞核,提高对血管内皮细胞的转染效率.方法 构建含NF-κB结合基序的人SDF-1α质粒(phSDF-1α-NF-κB)和不含NF-κB结合基序的人SDF-1α质粒(phSDF-1α),用核酸染料Cy3标记后在优化的UTMD条件下分别转染人脐静脉血管内皮细胞.
目的 研究磁场对成肌细胞Na+通道特性的影响.方法 实验分为空白对照和280 mT磁场作用组,将成肌细胞暴露于由磁铁产生的280 mT恒定磁场强度中,每组分别于12、36、60h后,应用全细胞膜片钳技术记录成肌细胞钠电流的激活、失活以及恢复曲线.结果 空白对照组中,Na+通道开放的数目并不会随细胞培养时间的增加而发生改变.280 mT磁场作用组中,作用36 h,60h后峰电流密度值与其他组差异有统
目的 观察CT引导下放射性粒子125I植入治疗原发性肝癌的近期疗效和安全性.方法 收集2010年4月至2011年3月在中山大学附属第一医院及解放军第四五八医院收治的原发性肝癌病例63例,接受研究病灶75个(其中16个病灶长径小于5 cm,其余病灶长径大于5 cm),均行CT引导下放射性粒子125I植入治疗.术后2个月分别行CT检查评价粒子植入治疗效果.分别记录术前、术后3d、1个月、2个月肝功能变
气管相关疾病包括良性病变如医源性、先天与后天畸形、创伤、感染等引起的疾病及恶性病变如肿瘤等,病变部位切除并行端端吻合是治疗的金标准.然而,这仅限于病变气管段不超过成人气管总长度的1/2或儿童的1/3,且仅能单一缓解病情[1].传统长段气管病变(>6 cm)的异体移植治疗极具外科手术风险性,且需终生服用免疫抑制剂,早期临床试验患者多死于移植物血管再生障碍、感染及纵隔炎.自体移植曾临床用于气道小病变的
期刊
缺氧性肺血管收缩(hypoxic pulmonary vasoconstriction,HPV)是肺动脉应对缺氧环境所产生的生理反应,近年研究发现肺动脉平滑肌细胞(pulmonary arterial smooth muscle cell,PASMC)的氧感受器机制是诱发HPV产生的主要原因.这些对氧分压(pressure of oxygen,PO2)微小变化极度敏感的感受器装置通过调节机体的呼吸
期刊
目的 比较增生性瘢痕与正常皮肤组织的蛋白质组表达差异,筛选出增生性瘢痕的特异蛋白质.方法 以中山大学附属第一医院烧伤外科2010年1月至5月8例增生性瘢痕患者的增生性瘢痕组织和3例整形外科患者正常躯干皮肤为研究对象,运用蛋白质组学技术、双向凝胶电泳对比分析增生性瘢痕组织和正常皮肤组织中蛋白表达差异,选择差异蛋白点进行MALDI - TOF/TOF质谱分析和生物学信息分析.结果 获得重复性较好的双向
期刊
凋亡素(apoptin)是一种来源于鸡贫血病毒(chicken anemia virus,CAV)的小分子量蛋白.CAV是一种无囊膜的DNA病毒,其基因组为2300 bp的单链环状DNA分子,含有3个完全或部分重叠的开放读码框,分别编码3个蛋白质:VP1、VP2和VP3[1].VP1为主要的衣壳蛋白,相对分子质量51 600.VP2为非结构蛋白,相对分子质量24 000,其具有双重性质的磷酸酶活性
目的 探讨环氧化酶(COX)-2-前列腺素(PG)E2通路在硫化氢(H2S)保护人皮肤角质形成细胞(HaCaT细胞)对抗化学性缺氧引起的损伤中的作用.方法 用化学性缺氧模拟剂氯化钴(CoCl2)处理HaCaT细胞,建立缺氧引起皮肤损伤的体外模型.在CoCl2处理前,用不同浓度的H2S的供体硫氢化钠(NaHS)预处理30 min,检测H2S对CoCl2引起的细胞损伤的影响;应用细胞计数试剂盒(CCK
目的 比较代谢综合征(MS)患者与健康对照人群血清基质金属蛋白酶2(MMP-2)水平,探讨MMP-2水平与MS疾病组成成分及相关危险因素的关系.方法 2009年7月至10月于广州市海珠区龙凤社区及素社社区进行流行病学调查,筛选出MS组75例和对照组82例.采用ELISA法检测MS组及对照组血清MMP-2水平.对MS组患者的血清MMP-2水平与MS各组成成分及相关危险因素进行相关性分析.结果 与对照