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摘 要：本实验对橘红痰咳煎膏的质量标准进行研究。含量测定方法：采用奥泰公司C18色谱柱（220 mm×4.6mm，5μm），甲醇-水（75∶25）为流动相，检测波长为220nm，流速为1.0ml/min，柱温为30℃；鉴别方法：硅胶G薄层板，以苯-丙酮-乙酸乙酯-浓氨试液（2∶3∶4∶0.2）为展开剂，以碘化铋钾试液为显色剂。结论：本法简便、准确，可作为橘红痰咳煎膏的质量标准。
关键词：橘红痰咳煎膏；质量标准；研究
橘红痰咳煎膏为棕色的半流体；气芳香，味甜、微苦。橘红痰咳煎膏由化橘红、百部（蜜炙）、茯苓、半夏（制）、白前、甘草、苦杏仁、五味子组成。橘红痰咳煎膏具有理气祛痰，润肺止咳的功效。橘红痰咳煎膏常用于治疗感冒，支气管炎、咽喉炎引起的痰多咳嗽，气喘等症。五味子俗称山花椒、秤砣子、药五味子等，最早列于神农本草经上品。五味子具有敛肺、滋肾、生津、收汗、涩精的功效。五味子常用于治肺虚喘咳、口干作渴、盗汗、劳伤羸瘦、久泻久痢等[1-4]。百部具有润肺下气止咳，杀虫的功效。蜜百部具有润肺止咳的功效，用于阴虚劳嗽。《纲目》记载：“百部，亦天门冬之类，故皆治肺病杀虫，但百部气温而不寒，寒嗽宜之；天门冬性寒而不热，热嗽宜之，此为异耳。”本实验对橘红痰咳煎膏的质量标准进行研究。
1 仪器与试药
1.1仪器：PM1-300TD超声波清洗机（上海凌初环保仪器有限公司）；5418R小型台式冷冻离心机（Eppendorf 中国有限公司）；DC超低温恒温槽（南京先欧仪器制造有限公司）；EPED-RO-EDI超纯水机（南京易普易达科技发展有限公司）； LC-5520高效液相色谱仪（北京东西分析仪器有限公司）；756紫外可见分光光度计（上海现科分光仪器有限公司）；BSA124S电子分析天平（东莞康润仪器设备有限公司）；RE-52AA旋转蒸发仪（东莞康润仪器设备有限公司）。
1.2 色谱柱：奥泰公司C18色谱柱（220 mm×4.6mm，5μm）。
1.3 对照品：五味子醇甲
1.4 试剂：丙酮（上海源景化学品有限公司）、甲酸（天津市凯力达化工贸易有限公司）、甲醇（台州市中海医药化工有限公司）、乙腈（常州市耕耘化工有限公司）、苯（上海源景化学品有限公司）、浓氨（上海源景化学品有限公司）。
1.5 试药：橘红痰咳煎膏
2 测定方法确定
2.1 色谱条件
依据查阅文献及考查的结果，确定色谱条件如下[5-11]。流动相：甲醇-水（75∶25）为流动相，检测波长：220nm，流速：1.0m·min-1。柱温：30℃。理论板数按五味子醇甲峰计算应不得低于2000。
2.2 对照品溶液的制备
精密称取五味子醇甲对照品适量，置容量瓶中，加流动相制成每1mL含20μg的溶液，即得。
2.3供试品溶液的制备
取橘红痰咳煎膏适量，精密称定，加50毫升流动相超声提取30分钟，过滤，将滤液蒸至近干，残渣用流动相溶解后转移至5ml量瓶中，并稀释至刻度，摇匀，用微孔滤膜（0.45μm）滤过，即得。
2.4 专属性试验
取化橘红、百部（蜜炙）、茯苓、半夏（制）、白前、甘草、苦杏仁药材按样品制备工艺制成阴性对照样品，按上述实验方法检测，结果阴性试验没有干扰，表明本方法专属性良好。
2.5 精密度试验
取对照品溶液按上述色谱条件，精密吸取20μl，连续进样6次，记录峰面积。结果，RSD=0.65%，表明本方法精密度良好。
2.6 对照品的线性考察
精密称取适量五味子醇甲对照品，加入流动相溶液使溶解分别配制成每毫升含5、10、20、30、40、50、60、70、80微克的溶液。分别精密上述溶液吸取10μL，注人液相色谱仪，依照2.1项下的色谱条件测定，记录色谱峰。以峰面积（Y）为纵坐标，对照品进样量（X）为横坐标，绘制标准曲线。结果表明，五味子醇甲在5～80μg·mL-1范围内呈良好的线性关系。
2.7 重现性试验
称取同一批的橘红痰咳煎膏样品6份，按测定方法项下的方法制备供试品溶液，测定含量，并计算样品的RSD值，结果RSD为0.68%，结果表明此方法的重现性良好。
2.8 准确度试验
取对照品适量分别精密加入橘红痰咳煎膏中，按含量测定进行测定，计算回收率为99.6%，RSD为0.53%。
2.9 样品含量测定
依照上述含量测定方法，再按外标法以峰面积计算样品的含量，结果三批样品的含量分别为203？滋g/g、210？滋g/g、209？滋g/g。
3 鉴别
取橘红痰咳煎膏适量（约相当于百部药材3g），加20毫升水稀释，加浓氨试液1ml，加三氯甲烷萃取2次，每次30ml，合并三氯甲烷层，水浴蒸干，残渣加三氯甲烷2ml使溶解，制成供试品溶液。另取3克百部对照药材，按上述方法制备，作为对照品溶液。取化橘红、茯苓、半夏（制）、白前、甘草、苦杏仁、五味子药材按样品制备工艺制成阴性对照样品，按上述方法制成阴性对照样品。照薄层色谱法（附录Ⅵ B）试验，吸取上述三种溶液各10μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以苯-丙酮-乙酸乙酯-浓氨试液（2∶3∶4∶0.2）为展开剂，展开，取出，晾干，喷以碘化铋钾试液。供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点，而阴性对照无干扰。
4 结论
本实验分离效果好、方法简便、快捷、准确、专属性好，可用于橘红痰咳煎膏中五味子醇甲的含量测定。样品与百部对照药材对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点，阴性无干扰。该鉴别方法专属性强，操作简单，可用于橘红痰咳煎膏中百部的鉴别。
参考文献
[1]李建平，单安山.五味子的生物学作用与应用[J].中国畜牧兽医，2006（04）.
[2]李海涛，胡刚.五味子醇甲抑制6-羟基多巴胺诱导PC12细胞凋亡的研究[J].南京中医药大学学报，2004（02）.
[3]霍艳双，陈晓辉，李康，毕开顺，王敏伟.北五味子的镇静、催眠作用[J].沈阳药科大学学报，2005（02）.
[4]蒋仕丽，章蕴毅，陈道峰.异型南五味子丁素、五味子酚和（+）-安五脂素对血小板聚集的影响[J].复旦学报（医学版），2005（04）.
[5]谭晓虹，王志宝，赵倩.HPLC测定南、北五味子中五味子甲素和五味子乙素的含量[J].中成药，2010（01）.
[6]徐良梅，燕昌江，李建平，单安山.高效液相色谱法测定北五味子提取物中五味子甲素和乙素含量[J].分析仪器，2008（02）.
[7]孙绍群.RP-HPLC法对不同产地五味子的五味子甲素和乙素的分析[J].中外医疗，2009（03）.
[8]宋九华，杨孝容.HPLC测定安神补心丸中五味子醇甲、五味子酯甲和五味子甲素的含量[J].中成药，2008（03）.
[9]杨孝容，向清祥，陈稼轩.高效液相色谱法测定五味子和含五味子的制剂中五味子乙素及多种活性成分时流动相体系的选择[J].色谱，2009（03）.
[10]宋九华，杨孝容，张成志.HPLC测定安神补心丸中的五味子醇甲、五味子酯甲、五味子甲素、五味子乙素和丹参酮Ⅱ_A[J].华西药学杂志，2008（01）.
[11]宣东平，窦志华，尤蝠仪，曹卫菊，李伟红，吴陈军.高效液相色谱法测定五味子浸膏中五味子醇甲与五味子乙素的含量[J].时珍国医国药，2008（03）.
关键词：橘红痰咳煎膏；质量标准；研究
橘红痰咳煎膏为棕色的半流体；气芳香，味甜、微苦。橘红痰咳煎膏由化橘红、百部（蜜炙）、茯苓、半夏（制）、白前、甘草、苦杏仁、五味子组成。橘红痰咳煎膏具有理气祛痰，润肺止咳的功效。橘红痰咳煎膏常用于治疗感冒，支气管炎、咽喉炎引起的痰多咳嗽，气喘等症。五味子俗称山花椒、秤砣子、药五味子等，最早列于神农本草经上品。五味子具有敛肺、滋肾、生津、收汗、涩精的功效。五味子常用于治肺虚喘咳、口干作渴、盗汗、劳伤羸瘦、久泻久痢等[1-4]。百部具有润肺下气止咳，杀虫的功效。蜜百部具有润肺止咳的功效，用于阴虚劳嗽。《纲目》记载：“百部，亦天门冬之类，故皆治肺病杀虫，但百部气温而不寒，寒嗽宜之；天门冬性寒而不热，热嗽宜之，此为异耳。”本实验对橘红痰咳煎膏的质量标准进行研究。
1 仪器与试药
1.1仪器：PM1-300TD超声波清洗机（上海凌初环保仪器有限公司）；5418R小型台式冷冻离心机（Eppendorf 中国有限公司）；DC超低温恒温槽（南京先欧仪器制造有限公司）；EPED-RO-EDI超纯水机（南京易普易达科技发展有限公司）； LC-5520高效液相色谱仪（北京东西分析仪器有限公司）；756紫外可见分光光度计（上海现科分光仪器有限公司）；BSA124S电子分析天平（东莞康润仪器设备有限公司）；RE-52AA旋转蒸发仪（东莞康润仪器设备有限公司）。
1.2 色谱柱：奥泰公司C18色谱柱（220 mm×4.6mm，5μm）。
1.3 对照品：五味子醇甲
1.4 试剂：丙酮（上海源景化学品有限公司）、甲酸（天津市凯力达化工贸易有限公司）、甲醇（台州市中海医药化工有限公司）、乙腈（常州市耕耘化工有限公司）、苯（上海源景化学品有限公司）、浓氨（上海源景化学品有限公司）。
1.5 试药：橘红痰咳煎膏
2 测定方法确定
2.1 色谱条件
依据查阅文献及考查的结果，确定色谱条件如下[5-11]。流动相：甲醇-水（75∶25）为流动相，检测波长：220nm，流速：1.0m·min-1。柱温：30℃。理论板数按五味子醇甲峰计算应不得低于2000。
2.2 对照品溶液的制备
精密称取五味子醇甲对照品适量，置容量瓶中，加流动相制成每1mL含20μg的溶液，即得。
2.3供试品溶液的制备
取橘红痰咳煎膏适量，精密称定，加50毫升流动相超声提取30分钟，过滤，将滤液蒸至近干，残渣用流动相溶解后转移至5ml量瓶中，并稀释至刻度，摇匀，用微孔滤膜（0.45μm）滤过，即得。
2.4 专属性试验
取化橘红、百部（蜜炙）、茯苓、半夏（制）、白前、甘草、苦杏仁药材按样品制备工艺制成阴性对照样品，按上述实验方法检测，结果阴性试验没有干扰，表明本方法专属性良好。
2.5 精密度试验
取对照品溶液按上述色谱条件，精密吸取20μl，连续进样6次，记录峰面积。结果，RSD=0.65%，表明本方法精密度良好。
2.6 对照品的线性考察
精密称取适量五味子醇甲对照品，加入流动相溶液使溶解分别配制成每毫升含5、10、20、30、40、50、60、70、80微克的溶液。分别精密上述溶液吸取10μL，注人液相色谱仪，依照2.1项下的色谱条件测定，记录色谱峰。以峰面积（Y）为纵坐标，对照品进样量（X）为横坐标，绘制标准曲线。结果表明，五味子醇甲在5～80μg·mL-1范围内呈良好的线性关系。
2.7 重现性试验
称取同一批的橘红痰咳煎膏样品6份，按测定方法项下的方法制备供试品溶液，测定含量，并计算样品的RSD值，结果RSD为0.68%，结果表明此方法的重现性良好。
2.8 准确度试验
取对照品适量分别精密加入橘红痰咳煎膏中，按含量测定进行测定，计算回收率为99.6%，RSD为0.53%。
2.9 样品含量测定
依照上述含量测定方法，再按外标法以峰面积计算样品的含量，结果三批样品的含量分别为203？滋g/g、210？滋g/g、209？滋g/g。
3 鉴别
取橘红痰咳煎膏适量（约相当于百部药材3g），加20毫升水稀释，加浓氨试液1ml，加三氯甲烷萃取2次，每次30ml，合并三氯甲烷层，水浴蒸干，残渣加三氯甲烷2ml使溶解，制成供试品溶液。另取3克百部对照药材，按上述方法制备，作为对照品溶液。取化橘红、茯苓、半夏（制）、白前、甘草、苦杏仁、五味子药材按样品制备工艺制成阴性对照样品，按上述方法制成阴性对照样品。照薄层色谱法（附录Ⅵ B）试验，吸取上述三种溶液各10μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以苯-丙酮-乙酸乙酯-浓氨试液（2∶3∶4∶0.2）为展开剂，展开，取出，晾干，喷以碘化铋钾试液。供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点，而阴性对照无干扰。
4 结论
本实验分离效果好、方法简便、快捷、准确、专属性好，可用于橘红痰咳煎膏中五味子醇甲的含量测定。样品与百部对照药材对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点，阴性无干扰。该鉴别方法专属性强，操作简单，可用于橘红痰咳煎膏中百部的鉴别。
参考文献
[1]李建平，单安山.五味子的生物学作用与应用[J].中国畜牧兽医，2006（04）.
[2]李海涛，胡刚.五味子醇甲抑制6-羟基多巴胺诱导PC12细胞凋亡的研究[J].南京中医药大学学报，2004（02）.
[3]霍艳双，陈晓辉，李康，毕开顺，王敏伟.北五味子的镇静、催眠作用[J].沈阳药科大学学报，2005（02）.
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[5]谭晓虹，王志宝，赵倩.HPLC测定南、北五味子中五味子甲素和五味子乙素的含量[J].中成药，2010（01）.
[6]徐良梅，燕昌江，李建平，单安山.高效液相色谱法测定北五味子提取物中五味子甲素和乙素含量[J].分析仪器，2008（02）.
[7]孙绍群.RP-HPLC法对不同产地五味子的五味子甲素和乙素的分析[J].中外医疗，2009（03）.
[8]宋九华，杨孝容.HPLC测定安神补心丸中五味子醇甲、五味子酯甲和五味子甲素的含量[J].中成药，2008（03）.
[9]杨孝容，向清祥，陈稼轩.高效液相色谱法测定五味子和含五味子的制剂中五味子乙素及多种活性成分时流动相体系的选择[J].色谱，2009（03）.
[10]宋九华，杨孝容，张成志.HPLC测定安神补心丸中的五味子醇甲、五味子酯甲、五味子甲素、五味子乙素和丹参酮Ⅱ_A[J].华西药学杂志，2008（01）.
[11]宣东平，窦志华，尤蝠仪，曹卫菊，李伟红，吴陈军.高效液相色谱法测定五味子浸膏中五味子醇甲与五味子乙素的含量[J].时珍国医国药，2008（03）.