【摘 要】
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目的 研究Ac2-26对体外循环血清致大鼠肺泡Ⅱ型上皮细胞损伤的影响.方法 采用IgG免疫粘附选择法提取大鼠原代肺泡Ⅱ型上皮细胞(AECⅡ),观察细胞生长形态,免疫荧光法和电镜对AECⅡ进行鉴定;细胞培养至72 h,分为3组:正常培养组(N组)、体外循环血清组(C组)、Ac2-26组(A组),依据实验分组处理12 h后,免疫荧光法检测AECⅡ细胞膜上的表面活性剂相关蛋白C(SP-C)的表达;透射电子显微镜观察各组AECⅡ细胞器形态;CCK8法检测各组AECⅡ的增殖活力;流式细胞检测细胞凋亡率.结果 与N组
【机 构】
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遵义医科大学 贵州省麻醉与器官保护重点实验室暨贵州省普通高等学校脑科学特色重点实验室,贵州 遵义 563099;贵州省司法警察医院 麻醉科,贵州 贵阳 550004
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目的 研究Ac2-26对体外循环血清致大鼠肺泡Ⅱ型上皮细胞损伤的影响.方法 采用IgG免疫粘附选择法提取大鼠原代肺泡Ⅱ型上皮细胞(AECⅡ),观察细胞生长形态,免疫荧光法和电镜对AECⅡ进行鉴定;细胞培养至72 h,分为3组:正常培养组(N组)、体外循环血清组(C组)、Ac2-26组(A组),依据实验分组处理12 h后,免疫荧光法检测AECⅡ细胞膜上的表面活性剂相关蛋白C(SP-C)的表达;透射电子显微镜观察各组AECⅡ细胞器形态;CCK8法检测各组AECⅡ的增殖活力;流式细胞检测细胞凋亡率.结果 与N组相比,C组细胞活力明显降低(P=0.009),细胞凋亡率增加(P<0.001);N组与A组之间细胞相对活力接近,无明显差异(P=0.743);与C组相比,A组细胞凋亡率降低(P<0.001),细胞活力增加(P=0.017);免疫荧光显示:与N组相比,C组部分细胞出现破裂坏死,SP-C荧光表达强度明显减弱,A组细胞形态与N组接近,荧光表达强度高;电镜显示:与N组相比,C组细胞胞核疏松,特异性结构嗜锇板层小体的平行排列消失,线粒体肿胀明显,A组细胞见嗜锇板层小体结构相对完好,可见部分线粒体轻度肿胀.结论 体外循环血清可诱导大鼠AECⅡ损伤,Ac2-26可增加细胞SP-C的表达,减轻细胞损伤,对大鼠AECⅡ有一定的保护作用.
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