【摘 要】
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目的 观察携带外源基因的腺病毒在体外感染胰岛及外源基因在胰岛中的表达.方法 构建表达Akt1的腺病毒载体(Ad5-Akt1).按病毒细胞比(MOI值)500感染新分离的胰岛.通过免疫印迹
【机 构】
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中国医科大学附属第一医院器官移植科
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目的 观察携带外源基因的腺病毒在体外感染胰岛及外源基因在胰岛中的表达.方法 构建表达Akt1的腺病毒载体(Ad5-Akt1).按病毒细胞比(MOI值)500感染新分离的胰岛.通过免疫印迹分析(Western blot)测定胰岛培养上清液中Akt1的表达.结果 (1)成功构建了携带Akt1基因的腺病毒载体Ad5-Akt1,所获得病毒滴度为5.3×109pfu/ml;(2)表达增强型绿色荧光蛋白的腺病毒(Ad5-EGFP)和Ad5-Akt1在体外可以感染胰岛,其中Ad5-EGFP转染率可达60%～70%.在Ad5-Akt1腺病毒感染的胰岛培养上清液中检测到了Akt1蛋白的表达.结论 腺病毒在体外可以有效感染大鼠胰岛,且携带的外源基因可以在胰岛细胞中稳定表达.
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