【摘 要】
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目的 通过转摹因细胞模型L02/HBx观察乙型肝炎病毒x基因(HBx)对DNA修复酶hMTH1转录表达的调控及其对人肝细胞系L02细胞生物学特性的影响.方法 传代培养稳定表达HBx的转基因细
【机 构】
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华中科技大学同济医学院附属同济医院消化内科,武汉,430030
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目的 通过转摹因细胞模型L02/HBx观察乙型肝炎病毒x基因(HBx)对DNA修复酶hMTH1转录表达的调控及其对人肝细胞系L02细胞生物学特性的影响.方法 传代培养稳定表达HBx的转基因细胞模型ID2/HBx及空白对照组ID2细胞和空载体对照组L02/pcDNA3.1细胞,倒置显微镜下观察各组细胞的形态学特征,以四甲基偶氮唑盐(MTT)比色法、流式细胞术枪测各组细胞增殖、细胞周期和凋亡状况,并进行软琼脂克隆形成实验观察细胞的恶性转化能力.同时应用实时定量PCR测定各组细胞DNA修复酶hMTH1的表达水平.结果 镜下观察发现L02/HBx细胞与对照组ID2细胞相比形态发生明显改变.MTT法显示L02/HBx细胞生长速度比两对照组显著加快.流式细胞术结果表明,HBx可加速细胞周期进程、抑制细胞凋亡.软琼脂克隆形成实验发现L02/HBx细胞的克隆形成率明显高于L02细胞和ID2/pcDNA3.1细胞(P
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