HDAC2磷酸化区域突变体的构建及其对小鼠成纤维细胞增殖的影响

来源 :重庆医学 | 被引量 : 0次 | 上传用户：liongliong533

【摘要】

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目的应用片段缺失突变技术鉴定HDAC2自身磷酸化对其Sumo-E3连接酶活性及蛋白质翻译的影响。方法以前期获得的鼠源性HDAC2Sumo-E3连接酶结构域基因片段为模板,设计片段缺失突

【作者】

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肖勇黄宏郭韡邢伟李向云袁培淞徐祥

【机构】

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第三军医大学附属大坪医院野战外科研究所/创伤、烧伤与复合伤国家重点实验室第一研究室

【出处】

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重庆医学

【发表日期】

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2015年13期

【关键词】

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HDAC2 Sumo-E3连接酶磷酸化修饰突变体构建成纤维细胞 histone deacetylases Sumo-E3 ligase phosphor

【基金项目】

：

基金项目：国家自然科学基金（30970661）、（81372060）,国家重点实验室自主研究课题基金（SKLZZ200907）.

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目的应用片段缺失突变技术鉴定HDAC2自身磷酸化对其Sumo-E3连接酶活性及蛋白质翻译的影响。方法以前期获得的鼠源性HDAC2Sumo-E3连接酶结构域基因片段为模板,设计片段缺失突变引物,经长片段重叠延伸PCR技术扩增获得片段缺失突变基因片段,后于Top10大肠杆菌中自然连接扩增获得pcDNA3.1/HDAC2-Sumo-E3连接酶磷酸化结构域缺失突变的真核表达载体。然后将载体转染于L929成纤维细胞瞬时过表达突变基因,再经翻译反应性荧光素酶报告基因实验和Western-blot鉴定HDAC2自身磷

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