紫花苜蓿耐盐测序扩增区段标记条件优化

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以中苜一号紫花苜蓿(Medicago sativa L.cv.Zhangmu No.1)为材料,对SCAR反应中的引物浓度、退火温度、Mg^2+、dNTP浓度、模板DNA用量及Taq酶用量进行优化。结果表明:在3对SCAR中有2对引物出现目标扩增带,其中以SCAR1的效果最好;适宜反应体系总体积为25μL、Mg^2+浓度2.5mM、dNTP浓度200μM、引物浓度0.5μM、Taq酶1.5U、模板DNA为50~100ng;优化后的反应体系能得到清晰稳定的SCAR扩增条带,可用于苜蓿耐盐性分子标记鉴定分析。
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