屋尘螨cDNA表达文库的构建及初步鉴定

来源 :第四军医大学学报 | 被引量 : 0次 | 上传用户:zhuanzhiboke
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目的:构建屋尘螨cDNA表达文库.方法:用RNAiso Reagent试剂盒提取屋尘螨Total RNA,用Poly AT tract mRNA分离试剂盒提取mRNA,用Clontech公司SMARTTM PCR cDNA library kit反转录合成第1链cDNA,用LD—PCR合成第2链cDNA并扩增,PCR产物与MaxPlax^TM试剂盒体外连接包装,建成未扩增的cDNA文库,计算其滴度和重组效率后进行文库扩增并测定扩增文库的滴度.结果:cDNA文库未扩增时滴度为9.148×10^6,
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