牛病毒性腹泻病毒E2基因在毕赤酵母GS115中的表达与鉴定

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【摘要】

：

将牛病毒性腹泻病毒（Bovine viral diarrhoea-mucosal disease virus，BVDV）河北分离株HB-bd毒株E2基因去除跨膜区获得sE2基因，将sE2基因克隆入巴斯德毕赤酵母（P．pastoris）分泌型表达

【作者】

：

赵月兰左玉柱范京惠王安忠杨汉春秦建华

【机构】

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河北农业大学中兽医学院,河北农业大学动物科技学院,中国农业大学动物医学院

【出处】

：

中国兽医学报

【发表日期】

：

2010年1期

【关键词】

：

BVDV E2基因毕赤酵母分泌型表达 bovine viral diarrhea virus（BVDV） E2 genes Pichia pasto

【基金项目】

：

国家“十一五”科技支撑计划资助项目（2006BAD04A10-4）,河北省重大技术创新专项计划资助项目（07227146Z-4）,河北农业大学科研基金项目

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将牛病毒性腹泻病毒（Bovine viral diarrhoea-mucosal disease virus，BVDV）河北分离株HB-bd毒株E2基因去除跨膜区获得sE2基因，将sE2基因克隆入巴斯德毕赤酵母（P．pastoris）分泌型表达载体pPIC9K中，筛选培养后提取阳性重组质粒，经酶切和PCR鉴定，命名为pPIC9K—sE2。重组质粒pPIC9K—sE2经salI酶切后，电穿孔导入P．pastoris GS115基因进行整合，使外源基因sE2稳定地整合到P．pastoris染色体中，G418筛

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